【生物】PCRの基礎知識について説明します

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今何かと話題のPCRですが、よく私が学生実験でやっていたので、その歴史について簡単に説明したいと思います。興味がある方はぜひ御覧ください。

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PCR…試験管内でDNAを増やすこと

 元のDNA(鋳型)
 +4つの基質ヌクレオチド(dNTP)
 +酵素(DNAポリメラーゼ)
 +プライマーDNA熱変性(1本鎖化)
 → プライマー添加 →冷却(ハイブリダイズ)
 → 酵素+dNTP
 ⇒ DNAは2倍
 得られたものを,もう一度,熱変性から繰り返す

耐熱性菌の酵素を用いると加熱・冷却の繰り返しが可能になった。⇒PCR法の発明

PCR(Polymerase Chain Reaction) ポリメラーゼ連鎖反応の概要

・一対のプライマー
・耐熱性DNAポリメラーゼ
・鋳型DNA
・基質ヌクレオチド(四種類)
 を試験官に入れて、

 95℃→50℃→70℃でDNA合成→95℃で2倍量にするの繰り返しで増やせる。

Kary Banks Mullis 「PCR:ポリメラーゼ連鎖反応」の開発

マリス博士(1944~)が開発し、1993年にノーベル化学賞を受賞している。

遺伝子組み換えなしにDNA増幅ができる。
プライマーの設定でDNAの増やす部分を指定できる。
特定DNAを簡単,大量に扱える。
DNAの定量もできる。
特定遺伝子の有無をテストできる。
特定遺伝子の変異をテストできる。
DNAの多型による親子鑑定・病気診断など
非常に広範な研究・解析を簡単化し,加速した。

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